Une centrifugation simple à faible force g permet une lyse cellulaire légère et empêche un contact étendu des noyaux avec l'environnement cytoplasmique. Cette méthode rapide présente une reproductibilité élevée en raison de la manipulation cellulaire relativement faible requise par l'investigateur.
Qu'est-ce que la centrifugation fait aux cellules ?
La centrifugation à différentes vitesses permet de séparer les particules en "fractions", selon leur facilité à sédimenter (Encadré 1). Par exemple, à de faibles vitesses de centrifugation, les grosses cellules peuvent être séparées des petites cellules.
La centrifugation élimine-t-elle les cellules mortes ?
Séparation des cellules mortes et vivantes par centrifugation
L'une des méthodes les plus simples d'élimination des débris cellulaires est la centrifugation à gradient de densité. La centrifugation à gradient de densité exploite un appareil appelé centrifugeuse qui fait tourner un mélange hétérogène à grande vitesse.
Comment lyse-t-on les cellules ?
Cette technique consiste à congeler une suspension cellulaire dans un bain sec de glace/éthanol ou un congélateur, puis à décongeler le matériau à température ambiante ou à 37 °C. Cette méthode de lyse fait gonfler les cellules et finit par se briser lorsque des cristaux de glace se forment pendant le processus de congélation, puis se contractent pendant la décongélation.
Que se passe-t-il lorsque vous centrifugez des cellules trop rapidement ?
Tourner trop vite peut provoquer un "frottis" de cellules sur la paroi du tube qui peut vous manquer lors de la remise en suspension des cellules.
