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Lorsque vous décongelez des cellules animales, vous devriez ?

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Lorsque vous décongelez des cellules animales, vous devriez ?
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Vidéo: Lorsque vous décongelez des cellules animales, vous devriez ?

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Vidéo: Congeler, décongeler, recongeler...que faut-il savoir ? 2024, Juillet
Anonim

Lignes directrices pour la décongélation des cellules

  1. Décongeler les cellules congelées rapidement (< 1 minute) dans un bain-marie à 37°C.
  2. Diluer lentement les cellules décongelées avant de les incuber, en utilisant un milieu de croissance préchauffé.
  3. Plaque de cellules décongelées à haute densité pour optimiser la récupération.
  4. Utilisez toujours une technique aseptique appropriée et travaillez sous une hotte à flux laminaire.

Pourquoi décongeler les cellules ?

Il est essentiel de décongeler correctement les cellules afin de maintenir la viabilité de la culture et de permettre à la culture de récupérer plus rapidement. Certains cryoprotecteurs, comme le DMSO, sont toxiques au-dessus de 4 °C. Par conséquent, il est essentiel que les cultures soient décongelées rapidement et diluées dans un milieu de culture pour minimiser les effets toxiques.

Quel est le processus de décongélation ?

La décongélation est le processus consistant à amener un produit congelé à une température (généralement supérieure à 0 °C) où il n'y a pas de glace résiduelle, c'est-à-dire la "décongélation". La décongélation est souvent considérée comme une simple inversion du processus de congélation.

Quelle est la meilleure façon de geler des cellules ?

Congelez les cellules lentement en réduisant la température d'environ 1 °C par minute à l'aide d'un cryo-congélateur à débit contrôlé ou d'un récipient de cryo-congélation tel que Mr. Frosty », disponible auprès du matériel de laboratoire Thermo Scientific Nalgene (Nalge Nunc). Utilisez toujours le milieu de congélation recommandé.

Comment décongeler une cellule primaire ?

Essuyez l'extérieur du flacon de cellules avec de l'éthanol ou de l'isopropanol à 70 %. Dans une enceinte de sécurité biologique, tournez le bouchon d'un quart de tour pour relâcher la pression interne, puis resserrez. Décongelez rapidement les cellules dans un bain-marie à 37 °C en agitant doucement le flacon. Retirez le flacon lorsqu'il reste une petite quantité de glace.

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