Pourquoi utilisons-nous la nitrocellulose en western blot ?

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Pourquoi utilisons-nous la nitrocellulose en western blot ?
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Vidéo: Détection des protéines spécifiques par WESTERN BLOT : Principe et Protocole | Biochimie Facile 2024, Décembre
Anonim

Les membranes de nitrocellulose sont une matrice populaire utilisée dans le transfert de protéines en raison de leur haute affinité de liaison aux protéines, de leur compatibilité avec une variété de méthodes de détection (chimiluminescence, chromogénique et fluorescence), et la capacité d'immobiliser des protéines, des glycoprotéines ou des acides nucléiques.

Pourquoi utilisons-nous la nitrocellulose ?

Une lame de nitrocellulose, une membrane de nitrocellulose ou un papier de nitrocellulose est une membrane collante utilisée pour immobiliser les acides nucléiques dans les Southern blots et les Northern blots Elle est également utilisée pour l'immobilisation des protéines dans les western transferts et microscopie à force atomique pour son affinité non spécifique pour les acides aminés.

Pourquoi le PVDF est-il utilisé dans le transfert Western ?

Le transfert Western utilisant des membranes de difluorure de polyvinylidène (PVDF) est l'une des techniques les plus populaires pour la détection et la caractérisation des protéines. Si cette technique est associée à l'immunodétection, le comportement d'une protéine particulière peut être clarifié.

La membrane de nitrocellulose est-elle hydrophobe ?

Contrairement au polyacrylamide, la nitrocellulose fournit un support approprié pour la coloration ultérieure des protéines ou la caractérisation immunochimique. La liaison à la nitrocellulose est principalement médiée par une interaction hydrophobe (Schneider, 1980), bien que des forces électrostatiques puissent également être impliquées (Farrah et al., 1981.

Quelle est la meilleure nitrocellulose ou PVDF ?

Alors que la nitrocellulose est cassante et fragile, PVDF est plus durable et a une résistance chimique plus élevée, ce qui la rend idéale pour les applications de resondage et de séquençage. La nitrocellulose peut s'avérer difficile à décaper et à retester sans perdre de signal.

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