Le test de complémentation de fluorescence bimoléculaire (BiFC) est une méthode utilisée pour visualiser directement l'interaction protéine-protéine in vivo en utilisant l'imagerie de cellules vivantes ou de cellules fixes. … BiFC a été décrit pour la première fois par Hu et al.
Comment fonctionne la complémentation par fluorescence bimoléculaire ?
Le principe de fonctionnement de BiFC est basé sur le développement d'un complexe fluorescent, résultant de l'association de deux segments d'une protéine fluorescente lorsqu'ils sont à proximité en raison de l'interaction protéine-protéine dans les fragments, c'est-à-dire, dans BiFC, un fluorophore est divisé en extrémités amino et carboxyle terminales.
Qu'est-ce que le test BiFC ?
test de complémentation de fluorescence bimoléculaire (BiFC) permet une visualisation simple et directe des interactions protéiques dans les cellules vivantes (45). L'approche BiFC est basée sur la formation d'un complexe fluorescent lorsque deux protéines fusionnées à des fragments non fluorescents d'une protéine fluorescente interagissent l'une avec l'autre (Fig.
Pourquoi le test BiFC est-il effectué ?
L'idée de BiFC est d'exprimer des moitiés de GFP fusionnées à vos protéines d'intérêt Si les POI interagissent, vous pouvez réunir les deux moitiés pour obtenir une GFP fonctionnelle. Donc, s'il y a la moitié d'une GFP exprimée dans la cellule, je ne suis pas surpris qu'un anticorps GFP puisse la détecter.
Le BiFC est-il réversible ?
L'irréversibilité des complexes BiFC a été bien documentée (10), et il semblerait que la plupart, sinon la totalité, des systèmes BiFC à base de protéines fluorescentes sont irréversibles (8, 33, 43, 48–51).
