Les ampholytes sont utilisés pour former un gradient de pH dans le capillaire, et les protéines à séparer migrent (ou sont focalisées) à travers le milieu ampholyte jusqu'à ce qu'elles se déchargent à leur pI valeurs.
Pourquoi les ampholytes sont-ils utilisés dans l'IEF ?
En IEF, les ampholytes voyagent selon leur charge sous l'influence d'un champ électrique, en présence d'un gradient de pH, jusqu'à ce que la charge nette de la molécule soit nulle (ex., point isoélectrique, pI). … Même les ampholytes les plus simples (par exemple, les acides aminés) peuvent créer un gradient de pH et agir comme un tampon isoélectrique.
Pourquoi le point isoélectrique est-il important ?
Le point isoélectrique est important dans la purification des protéines car il représente le pH où la solubilité est généralement minimale. … Ce polymère a des propriétés uniques pour garantir que les protéines forment un gradient de pH lorsque vous appliquez un champ électrique à travers la solution.
Comment les ampholytes créent-ils un gradient de pH ?
Dans CIEF, un gradient de pH hétérogène est créé à l'intérieur du capillaire en appliquant une tension à travers les ampholytes porteurs L'ampleur du gradient de pH dépend de la série d'ampholytes sélectionnée. Les ampholytes sont disponibles dans le commerce pour couvrir les plages de pH larges et étroites, comme le montre la figure 5.2.
Qu'est-ce que la chimie des ampholytes ?
Les ampholytes sont des composés qui, lorsqu'ils sont dissous dans l'eau (qui est lui-même un composé amphotère), peuvent agir soit comme acide, soit comme base.
